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普通光學(xué)顯微鏡的結(jié)構(gòu)原理和使用維護(hù)
普通光學(xué)顯微鏡的結(jié)構(gòu)原理和使用維護(hù)
1.結(jié)構(gòu):
標(biāo)本的放大主要由物鏡完成,物鏡放大倍數(shù)越大,它的焦距越短。焦距越小,物鏡的透鏡和玻片間距離(工作距離)也小。油鏡的工作距離很短,使用時需格外注意。目鏡只起放大作用,不能提高分辨率,標(biāo)準(zhǔn)目鏡的放大倍數(shù)是十倍。聚光鏡能使光線照射標(biāo)本后進(jìn)入物鏡,形成一個大角度的錐形光柱,因而對提高物鏡分辨率是很重要的。聚光鏡可以上下移動,以調(diào)節(jié)光的明暗,可變光闌可以調(diào)節(jié)入射光束的大小。
顯微鏡用光源,自然光和燈光都可以,以燈光較好,因光色和強(qiáng)度都容易控制。一般的顯微鏡可用普通的燈光,質(zhì)量高的顯微鏡要用顯微鏡燈,才能充分發(fā)揮其性能。有些需要很強(qiáng)照明,如暗視野照明、攝影等,常常使用鹵素?zé)糇鳛楣庠?。光學(xué)顯微鏡是由光學(xué)放大系統(tǒng)和機(jī)械裝置兩部分組成。光學(xué)系統(tǒng)一般包括目鏡、物鏡、聚光器、光源等;機(jī)械系統(tǒng)一般包括鏡筒、物鏡轉(zhuǎn)換器、鏡臺、鏡臂和底座等。
2.原理:
顯微鏡的放大效能(分辨率)是由所用光波長短和物鏡數(shù)值口徑?jīng)Q定,縮短使用的光波波長或增加數(shù)值口徑可以提高分辨率,可見光的光波幅度比較窄,紫外光波長短可以提高分辨率,但不能用肉眼直接觀察。所以利用減小光波長來提高光學(xué)顯微鏡分辨率是有限的,提高數(shù)值口徑是提高分辨率的理想措施。要增加數(shù)值口徑,可以提高介質(zhì)折射率,當(dāng)空氣為介質(zhì)時折射率為1,而香柏油的折射率為1.51,和載片玻璃的折射率(1.52)相近,這樣光線可以不發(fā)生折射而直接通過載片、香柏油進(jìn)入物鏡,從而提高分辨率。顯微鏡總的放大倍數(shù)是目鏡和物鏡放大倍數(shù)的乘積,而物鏡的放大倍數(shù)越高,分辨率越高。
二、普通顯微鏡的使用方法
1、低倍鏡觀察
先將低倍物鏡的位置固定好,然后放置標(biāo)本片,轉(zhuǎn)動反光鏡,調(diào)好光線,將物鏡提高,向下調(diào)至看到標(biāo)本,再用細(xì)調(diào)對準(zhǔn)焦距進(jìn)行觀察。除少數(shù)顯微鏡外,聚光鏡的位置都要放在zui高點(diǎn)。如果視野中出現(xiàn)外界物體的圖像,可以將聚光鏡稍微下降,圖像就可以消失。聚光鏡下的虹彩光圈應(yīng)調(diào)到適當(dāng)?shù)拇笮?,以控制射入光線的量,增加明暗差。
2、高倍鏡觀察
顯微鏡的設(shè)計一般是共焦點(diǎn)的。低倍鏡對準(zhǔn)焦點(diǎn)后,轉(zhuǎn)換到高倍鏡基本上也對準(zhǔn)焦點(diǎn),只要稍微轉(zhuǎn)動微調(diào)即可。有些簡易的顯微鏡不是共焦點(diǎn),或者是由于物鏡的更換而達(dá)不到共焦點(diǎn),就要采取將高倍物鏡下移,再向上調(diào)準(zhǔn)焦點(diǎn)的方法。虹彩光圈要放大,使之能形成足夠的光錐角度。稍微上下移動聚光鏡,觀察圖像是否清晰。
3、油浸鏡觀察
油浸鏡的工作距離很小,所以要防止載皮片和物鏡上的透鏡損壞。使用時,一般是經(jīng)低倍、高倍到油浸鏡。當(dāng)高倍物鏡對準(zhǔn)標(biāo)本后,再加油浸鏡觀察。載玻片標(biāo)本也可以不經(jīng)過低倍和高倍物鏡,直接用油浸鏡觀察。顯微鏡有自動止降裝置的,載玻片上加油以后,將油浸鏡下移到油滴中,到停止下降為止,然后用微調(diào)向上調(diào)準(zhǔn)焦點(diǎn)。沒有自動止降裝置的,對準(zhǔn)焦點(diǎn)的方法是從顯微鏡的側(cè)面觀察,將油浸鏡下移到與載玻片稍微接觸為止,然后用微調(diào)向上提升調(diào)準(zhǔn)焦點(diǎn)。
使用油浸鏡時,鏡臺要保持水平,防止油流動。油浸鏡所用的油要潔凈,聚光鏡要提高到*高點(diǎn),并放大聚光鏡下的虹彩光圈,否則會降低數(shù)值口徑而影響分辨率。無論是油浸鏡或高倍鏡觀察,都宜用可調(diào)節(jié)的顯微鏡燈作光源。
三、普通顯微鏡的保養(yǎng)
顯微鏡是精密貴重的儀器,必須很好地保養(yǎng)。顯微鏡用完后要放回原來的鏡箱或鏡柜中,同時要注意下列事項(xiàng):
1、觀察完后,移去觀察的載玻片標(biāo)本。
2、用過油浸鏡的,應(yīng)先用擦鏡紙將鏡頭上的油擦去,再用擦鏡紙蘸著二甲苯擦拭2—3次,再用擦鏡紙將二甲苯擦去。
3、轉(zhuǎn)動物鏡轉(zhuǎn)換器,放在低倍鏡的位置。
4、將鏡身下降到*低位置,調(diào)節(jié)好鏡臺上標(biāo)本移動器的位置,罩上防塵套。
鏡頭的保護(hù)尤為重要。鏡頭要保持清潔,只能用軟而沒有短絨毛的擦鏡紙擦拭。擦鏡紙要放在紙盒中,以防沾染灰塵。切勿用手絹或紗布等擦鏡頭。物鏡在必要時可以用溶劑清洗,但要注意防止溶解固定透鏡的膠固劑。根據(jù)不同的膠固劑,可選用不同的溶劑,如酒精、丙酮和二甲苯等,其中較為安 全的是二甲苯。方法是用脫脂棉花團(tuán)蘸取少量的二甲苯,輕擦,并立即用擦鏡紙將二甲苯擦去,然后用洗耳球吹去可能殘留的短絨。目鏡是否清潔可以在顯微鏡下檢視。轉(zhuǎn)動目鏡,如果視野中可以看到污點(diǎn)隨著轉(zhuǎn)動,則說明目鏡已沾有污物,可用擦鏡紙擦拭接目的透鏡。如果還不能除去,再擦拭下面的透鏡,擦過后用洗耳球?qū)⒍探q吹去。在擦拭目鏡或由于其他原因需要取下目鏡時,都要用擦鏡紙將鏡筒的口蓋好,以防灰塵進(jìn)入鏡筒內(nèi),落在鏡筒下面的物鏡上。
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